為了保障動物性食品的安全性,使用獸藥后的動物,或者類似蛋、奶類動物源性食品在上市銷售前,都要停止使用獸藥一段時間。這段時間便是休藥期,休藥期的制定是為了給獸藥殘留徹底或規定限量范圍內消除給予-定的緩沖時間,也是為了將獸藥殘留對消費者產生的毒害作用降到最低。按照獸藥殘留檢測的相關規定,用于食品動物的獸藥產品均需通過獸藥殘留消除試驗制定休藥期。也就是說凡申請在食品動物(如牛、羊、豬、離等)使用的獸藥均需要進行殘留消除試驗確定休藥期。
獸藥殘留消除試驗多是針對動物可食性組織或蛋奶產品等樣品檢測,而且一般需要定性定量 分析。所以獸藥殘留消除試驗選擇的分析方法,就要求具有靈敏、專一、精確、可靠等特點。而且要充分考慮到,可能面臨的取樣量少、藥物濃度低、內源性物質干擾多、個體差異大等問題。尤其是內源性干擾物質要充分到,可能存在的激素、維生素、膽汁及其他同期服用的藥物等物質。
獸藥殘留消除試驗選擇分析方法的依據,可采用標準方法、非標準方法以及允許偏離的標準方法。標準方法顧名思義就是采用一些國家標準、 行業標準、地方標準、農業部公告給出的檢測方法作為依據,涉及到國外標準,可參考CAC、AOAC、 美國FSIS、 歐盟等檢測方法標準。非標準方法則是指具體根據需求指定的獸藥殘留檢測方法。而允許偏離的標準方法,則是指超出標準規定范圍使用的標準方法;經過擴充或更改的標準方法。
常見獸藥殘留消除試驗中分析方法主要有色譜法、免疫學方法、微生物學方法等。其中色譜法主要有高效液相色譜法、氣相色譜法、色譜-質譜聯用法等,可用于大多數藥物的檢測。從目前發展看,生物樣品的分析-般選擇色譜法,這類方法靈敏度、特異性、準確性-般都能適應殘留消除研究的需要。 具體選用何種分析方法應根據藥物的化學結構、理化性質、儀器條件以及借鑒文獻方法多方面因素來考慮確定。免疫學方法主要有放射免疫分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法等,多用于蛋白質多肽類物質的檢測。微生物學方法主要用于抗生素或部分抗寄生蟲藥的檢測,如果抗微生物藥的代謝產物仍有抗菌活性,則不宜選用微生物法。
無論選擇哪種方法,都要按照方法學驗證的要求進行驗證。方法學驗證是整個殘留消除試驗研究的基礎。為了保證分析方法可靠,必須對方法進行充分驗證。在進行方法驗證時要充分考慮到樣品的特異性問題、標準曲線和定 量范圍的選擇問題、檢測限和定 量限的問題、準確度與精密度的問題、樣品穩定性問題、 質量控制問題等。尤其微生物學或免疫學方法,他們的標準曲線本質上是非線性的,所以應采用比化學分析更多的濃度點來建立標準曲線。結果的準確度是關鍵因素,如果重復測定能夠改善準確度,則應在方法確證和末知樣品測定中可采用同樣的步驟。